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改良型TRAP染色试剂盒图片
产品货号:
HR9064
中文名称:
改良型TRAP染色试剂盒
英文名称:
Improved TRAP Staining Kit
产品规格:
30mL|60mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本染色液可用于新鲜血涂片、细胞涂片,亦可用于冰冻切片、石蜡切片。

酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)分布极广泛,遍布各种组织,主要存在于细胞的溶酶体内,所以常作为溶酶体标志酶。溶酶体外的酸性磷酸酶存在于内质网和胞质内。各种动物中的酸性磷酸酶各有不同,酸性磷酸酶的适宜pH为4.5~5.5。存在于正常人肺泡巨噬细胞和白血病人脾脏的抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistnt acid phosphatase,TRAP)均在细胞滤泡中,并不是释放入血液。血液中的TRAP绝大多数来源于破骨细胞,因此可以通过测量血液中的TRAP了解破骨细胞的功能状态。

抗酒石酸酸性磷酸酶染色液以萘酚AS-BI为底物,在酸性pH下被酸性磷酸酶水解释放出磷酸和萘酚,萘酚与重氮盐偶联生成有色产物,定位于细胞质中,若细胞内的ACP有抗酒石酸的活性,则呈阳性反应。

试剂盒组成:
组份3×10mL3×20mL
试剂A:TRAP固定液A25mL50mL
试剂B:TRAP孵育液B1:AS-BI Buffer2×0.5mL4×0.5mL
B2:GBC染色液0.1mL0.2mL
B3:TRAP Buffer9mL18mL
试剂C:苏木素染色液10mL20mL

保存条件:2-8℃避光保存,有效期6个月。


使用注意事项:
1.TRAP孵育液易失效,本法宜用皮肤穿刺血涂片,晾干后应及时染色;
2.B2:GBC染色液尽量4℃保存,尽量避免-20℃,以免潮解;
3.对冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。
4.样本需新鲜,取材后应立即处理,否则会影响酶的活性。
5.组织固定需在4℃冰箱进行,时间不宜超过24h,否则酶活性会减弱或消失。
6.一般不建议用石蜡切片。如果需要用石蜡切片,组织在石蜡包埋时,温度不宜高于56℃。应使用熔点为52~54℃的石蜡进行浸蜡,浸蜡时间要短,否则酶活性会减弱或消失。

试剂的配置:
使用前,将B1:B2:B3=10:1:90混合,即为TRAP孵育液,现配现用。

使用方法:

一、血液、细胞涂片:
1.推片:取新鲜血液或骨髓涂片置于在玻片上,推玻片于载玻片保持30度,置于血液或细胞滴液的正前方,稍往后移与血液或细胞滴液接触使后者沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动至铺满血膜为止;
2.自然晾干,TRAP固定液4℃固定30s~3min,多数情况下30~60s即可;
3.水洗,稍微晾干(不易过分干燥);
4.切片入TRAP孵育液,置于37℃恒温箱,避光浸染45~60min,水洗;
5.复染:苏木素染色液染色3~5min;
6.水洗、晾干、镜检。

二、冰冻切片
1.冰冻切片回温至37℃,水中浸泡1~2min;
2.自然晾干,TRAP固定液4℃固定1~3min;
3.水洗,稍微晾干(不易过分干燥);
4.切片入TRAP孵育液,置于37℃恒温箱,避光浸染45~60min,水洗;
5.复染:苏木素染色液染色5~8min;
6.水洗、晾干、镜检。

染色结果:
阳性颗粒紫红色
细胞核蓝色


毛细胞白血病的毛细胞ACP染色呈强阳性或中度阳性,且不被酒石酸抑制,其他细胞呈弱阴性或极弱阳性;
急性白血病幼单核细胞ACP染色呈阳性,原淋巴细胞呈弱阳性,原粒细胞对ACP反应不一;
T淋巴细胞ACP染色呈阳性,颗粒粗大,分布密集。B淋巴细胞呈阴性或颗粒细小的弱阳性;
戈谢细胞呈强阳性,尼曼-皮克细胞呈阴性或弱阳性。
相关搜索:改良型TRAP染色试剂盒Improved TRAP Staining Kit
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